Dicer, Drosha i wyniki u pacjentów z rakiem jajnika ad 6

Obniżony poziom mRNA dla Dicer był wskaźnikiem złego rokowania (współczynnik ryzyka, 2,10, 95% CI, 1,15 do 3,85, P = 0,02). Niski poziom mRNA Drosha nie był jednak niezależnym czynnikiem prognostycznym przeżycia (współczynnik ryzyka, 1,22, 95% CI, 0,69 do 2,16, P = 0,50). Po sparowaniu w modelu interakcji poziomy niskiego Dicer i niskiego poziomu mRNA Drosha miały większy związek z obniżonym czasem przeżycia (współczynnik ryzyka, 4,00, 95% CI, 1,82 do 9,09, P <0,001), niż jeden sam. Aby potwierdzić nasze wyniki, wykorzystaliśmy wcześniej podane dane mikromacierzy do porównania ekspresji genów Dicer i Drosha z przeżyciem u 132 pacjentów z rakiem jajnika.19 Podobnie jak w naszych początkowych ustaleniach, zwiększone przeżycie było związane z wysoką ekspresją mRNA Drosha (współczynnik ryzyka, 0,55 95% CI, 0,34 do 0,89, P = 0,02) i mRNA Dicer (współczynnik ryzyka, 0,53, 95% CI, 0,33 do 0,85, P = 0,008) (Figura 2B).
Aby zbadać, czy to powiązanie występuje również w przypadku innych nowotworów, zmierzono względne wskaźniki ekspresji dla Dicer i Drosha w mikromacierzach z kohortami 91 pacjentów z rakiem płuc19 i 129 pacjentów z rakiem sutka. 20 Zwiększone przeżycie w kohorcie raka płuc było związane z wysokie poziomy mRNA dla Dicer (współczynnik ryzyka, 0,43; 95% CI, 0,23 do 0,80, P = 0,008), ale nie mRNA Drosha (współczynnik ryzyka, 1,34, 95% CI, 0,74 do 2,40, P = 0,33) (Figura 2C). Podobnie wzrost przeżycia wolnego od choroby w kohorcie raka piersi wiązał się z wysokim poziomem mRNA Dicer (współczynnik ryzyka, 0,32, 95% CI, 0,14 do 0,72, P = 0,006), ale nie z mRNA Drosha (współczynnik ryzyka, 0,93; 95% CI, 0,45 do 1,92, P = 0,84), podobnie jak całkowity czas przeżycia (dane nie przedstawione). Związek pomiędzy wysokimi poziomami mRNA Dicer i zwiększonym przeżyciem wolnym od choroby został również znaleziony z analizy mikromacierzy próbek pobranych z dwóch innych kohort pacjentów z rakiem sutka: jeden z 159 pacjentami21 (współczynnik ryzyka, 0,33; 95% CI, 0,17 do 0,66; P = 0,002) (Figura 2D) i jedna z 249 pacjentami22 (współczynnik ryzyka, 0,64; 95% CI, 0,42 do 0,97; P = 0,04) (Figura 2E).
Mutacje Dicera i Droshy
Następnie zbadaliśmy, czy zmienne poziomy mysiego Dicer i Drosha można wyjaśnić obecnością mutacji. Początkowe badania, przeprowadzone na liniach komórkowych o wysokiej lub niskiej ekspresji genu, ujawniły kilka mutacji missense dla obu genów i jedną mutację miejsca składania dla genu Drosha (patrz dodatek dodatkowy). Następnie genomowy DNA z 37 nowotworów jajnika uprzednio analizowany pod kątem mRNA Dicer i Drosha zbadano pod kątem mutacji genu Dicer i Drosha. W przypadku genu Dicer wykryto dwie mutacje missens w dwóch nowotworach. Podobnie, wykryto dwie mutacje missense dla genu Drosha. Mutacje te nie były jednak związane ze zmianami poziomów mRNA Dicer lub Drosha.
Analiza funkcjonalna zmniejszonej ekspresji Dicer
Figura 3. Figura 3. Transfekcja małego interferującego RNA (siRNA) i RNA o krótkiej spinki do włosów (shRNA) nakierowanego na galektynę-3 w liniach komórkowych jajnika-raka o niskiej ekspresji w gronie i tych z wysoką ekspresją gronkowca. Analizę densytometryczną typu Western blot przeprowadzono dla linii komórkowych transfekowanych sekwencjami siRNA lub shRNA lub kontrolnych (nie kierowania). Aktynę stosowano do celów normalizacji.
Aby wyjaśnić funkcjonalne konsekwencje niskich poziomów mRNA Dicer, porównaliśmy wyciszanie ekspresjonowanego konstytutywnie genu, genu galektyny-3, między liniami komórek raka jajnika o wysokiej ekspresji Dicer i tymi z niską ekspresją Dicer
[podobne: choligrip syrop, asertin skutki uboczne, eskulap rypin ]

Powiązane tematy z artykułem: asertin skutki uboczne choligrip syrop eskulap rypin