Dicer, Drosha i wyniki u pacjentów z rakiem jajnika ad 7

Konkretnie, porównaliśmy konstrukty shRNA (wykazujące stabilne wyciszanie genów) z krótszymi fragmentami siRNA (które mają przejściowe wyciszanie genów) (Figura 3). W porównaniu z konstruktami kontrolnymi (niedocelowymi), transfekcja siRNA zmniejszyła poziomy galektyny-3 w liniach komórkowych o niskiej ekspresji Dicer: HeyA8, która wykazała redukcję o 78% w stosunku do poziomu kontrolnego, oraz SKOV3ip1, zmniejszoną o 95% od kontroli poziom. Natomiast w tych komórkach zanotowano złe wyciszanie za pomocą shRNA (odpowiednio 8% i 4%). W komórkach OVCAR3 i 222, które mają wysoką ekspresję Dicer, wyciszanie galektyny-3 o 62% do 73% w porównaniu z poziomami kontrolnymi obserwowano dla obu konstruktów siRNA i shRNA. Dyskusja
Stwierdziliśmy, że ekspresja mRNA Dicer i Drosha jest zmienna wśród inwazyjnych nabłonkowych próbek raka jajnika oraz linii komórkowych raka jajnika i że są one znacząco związane z przeżyciem, co wskazuje, że poziomy mRNA Dicer i Drosha w komórkach raka jajnika są klinicznie istotne. Związek ten został zwalidowany w niezależnych zestawach danych klinicznych dotyczących raka jajnika. Szukaliśmy również mutacji w genomowych sekwencjach genów Dicer i Drosha w kohorcie pacjentów ze zmienną ekspresją genu i nie znaleźliśmy stałego trendu. Ponadto, wyniki naszych testów czynnościowych wskazują, że komórki o niskiej ekspresji Dicer nie mogą skutecznie wyciszać genów, gdy syntetyczne konstrukty shRNA zostały transfekowane.
Wytwarzanie dojrzałego endogennego interferującego RNA obejmuje kaskadę zdarzeń, które są nierozerwalnie związane z funkcjami Dicer i Drosha. Na przykład Lee i wsp.5 wykazali, że w komórkach z wyciszoną ekspresją Dicer lub Drosha zmniejszono sekwencje prekursorowe i dojrzałe miRNA. Utrata Dicer u myszy zakłóca różnicowanie embrionalne komórek macierzystych i jest śmiertelna podczas wczesnego rozwoju.26 Niski poziom mRNA Dicer wpływa również na prawidłowy rozwój komórkowy i odpowiedzi immunologiczne w modelach przedklinicznych.27-29 Ponadto, nieprawidłowości w liczbie kopii DNA wirusa Gen dicer i gen argonaute 2 (składnik indukowanego przez RNA kompleksu wyciszającego) opisano w przypadku czerniaka, piersi i raka jajnika u ludzi.13 Jest zatem możliwe, że zderegulowana ekspresja miRNA, obserwowana w kilku rodzajach nowotworów, 13 jest wtórne do wadliwych maszyn wyciszających RNA. Zmniejszony mRNA Dicer był również związany ze zmniejszeniem przeżywalności u pacjentów z niedrobnokomórkowym rakiem płuc. Ponadto wydaje się, że ekspresja Dicer ulega podwyższeniu w nieinwazyjnych prekursorach inwazyjnego gruczolakoraka płucnego.
Niektóre odkrycia w innych typach nowotworów są niezgodne z naszymi ustaleniami. Ekspresja High Dicer i wysoka ekspresja Drosha były skorelowane ze słabymi czynnikami prognostycznymi w raku gruczołu krokowego i raku przełyku.32,33 Ponadto, w liniach komórkowych raka przełyku odnotowano zmniejszenie ekspresji Drosha za pomocą zmniejszonej proliferacji siRNA 33. Istnieje kilka wiarygodne wyjaśnienia rozbieżnych wzorców ekspresji Dicer i Drosha wśród różnych guzów litych oraz ich związek ze zmiennymi klinicznymi i patologicznymi. Bezpośrednie interakcje z innymi składnikami kaskady interferencji RNA mogłyby spowodować kompensacyjne zmiany w ekspresji Dicer lub Drosha w obecności zmutowanych kofaktorów, takich jak geny dla genu 8 regionu krytycznego zespołu DiGeorge (DGCR8), eksportu 5 (XPO5) i argonaute 2 (AGO2) .31,34-36 Ponadto, miRNA może mieć zmienne działanie regulacyjne niezależnie od zmian w maszynerii przetwarzania interferencji RNA.37 Na poparcie tego sporu jest związek zmienionej ekspresji białka Dicer (zarówno nadekspresja, jak i niedowracenie w stosunku do do kontroli) w raku mukowopochodnym górnego odcinka przewodu pokarmowego z całkowitym przeżyciem.38
Pomimo rosnących dowodów na to, że poziomy mRNA Dicer i Drosha różnią się między typami nowotworów, regulacja tych genów jest niejasna
[patrz też: co ile oddawanie krwi, angio tk tętnic wieńcowych, przetoka odbytu zdjęcia ]

Powiązane tematy z artykułem: angio tk tętnic wieńcowych co ile oddawanie krwi przetoka odbytu zdjęcia